分光光度计,又称光谱仪(spectrometer),是将成分杂乱的光,分解为光谱线的科学仪器。丈量规模一般包含波长规模为380~780 nm的可见光区和波长规模为200~380 nm的紫防秒但外光区。不同的光源都有其特有的发射光谱,因而可选用不同的发光体作为仪器的光源。钨灯的发射光谱:钨灯光源所宣布的380~780nm波长的光谱光通过三棱镜折射后,可得到由红、橙、黄、绿、蓝、靛、紫组成漫卡的接连色谱;该色谱可作为可见光概资事分光光度计的光源。
分光光度计选用一个能够发生多个波长的光源,通过系列分光设备,然后发生特定波长的光源,光线透过测验的样品后,部分光线被吸收,核算样品的吸光值,然后转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。
单色光辐射穿过被测物质溶液时,被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚度(光路长度)成正比,其联系如下式:
物质对光的选择性吸收波长,以及相应的吸收系数是该物质的物理常数。当已知某纯物质在必定条件下的吸收系数后可用相同条件将该供试品配成溶液,测定其吸收度,即可由上式核算出供试品中该物质的含量。在可见光区,除某些物质对光有吸收外,许多物质自身并没有吸收但可在必定条件下参加显色试剂或通过处理使其显色后再测定,故又称。因为显色时影响呈色深浅的要素较多,且常运用单色光纯度较差的仪器,故测守时使用规范品或对照品一起操作。
4.将空白液及测定液别离倒入比色杯3/4处,用擦镜纸擦清外壁,放入样品室内,使空白管对准光路。
6.盖上暗箱盖,调理“100”调理器,使空白管的t=100,指针安稳后逐渐拉出样品滑竿,别离读出测定管的光密度值,并记载。